辽细辛的抑菌活性成分研究[范文]

摘要：目前，对辽细辛挥发性成分的研究较多，但非挥发性化学成分的报道较少，具有很大的研究空间。西北农林科技大学无公害研究服务中心前期筛选，发现辽细辛具有较强的抑制细菌活性，因此本试验在之前的研究基础上，以辽细辛为研究对象，对其抑菌活性成分进行研究，得到如下重要结果。
    1.采用生物活性追踪的方法，并采取硅胶柱层析、反相硅胶柱以及高效液相色谱等多种色谱分离技术，结合重结晶等分离手段,对辽细辛中抑菌活性物质进行分离纯化，最终获得3个单体化合物。通过核磁共振检测并结合文献数据确定了3个化合物的结构，分别为: β-谷甾醇（2.8g）、L-细辛脂素（2.2g）和L-芝麻脂素（18.8mg）。

辽细辛的抑菌活性成分研究

2.采用抑菌圈法测试辽细辛各段分离产物对水稻白叶枯病菌、金黄色葡萄球菌、烟草青枯病菌、白菜软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌和蜡状芽胞杆菌的抑菌活性，并以青霉素作为对照。结果表明: L-芝麻脂素对烟草青枯病菌、水稻白叶枯病菌具有较好的抑菌活性，浓度为5μg/ml时L-芝麻脂素对水稻白叶枯病菌的抑菌圈直径达8.3mm，明显大于青霉素处理（抑菌圈直径为0.7mm），值得进一步研究。

1.有效成分提取方法

天然植物产物的分离方法：(1)萃取：因为化合物在两种溶剂中的溶解度不同，利用这一特点，使目标化合物先后通过两种溶剂，溶剂与目标化合物充分接触后，静置一段时间，分离，蒸馏得到萃取粗提物[3](2)吸附法：利用吸附剂对物质的选择性吸附，以达到分离纯化的目的。(3)结晶和重结晶法：利用不同目标化合物在不同溶剂中的溶解度具有很大的差别的特性，使目标化合物溶解在一种溶剂中，然后另一种溶剂缓慢被加入，重复上述步骤，直到它的纯度满足所需要求。(4)柱层析法：化合物的分子大小具有一定的差异，因为了采用了不同的填充物，所以被分离的物质通过洗脱剂时，会因为分子大小不同而先后流下，从而达到分离的目的。 (5)沉淀法：根据一些物质的理化性质，能和其他试剂发生反应产生沉淀，除杂过滤后，目标化合物可以通过一些化学手段得到。(6)浸提法：即利用植物在特定的溶剂中浸泡，通过目标化合物中基团极性的大小不同，植物浸出液被提取，进行减压蒸馏，，多次重复上述步骤，得到植物粗提物。。现如今，生物科学技术迅猛发展，天然产物的分离也出现了许多新的方法，例如，大孔树脂法[4]、高速逆流色谱技术 [5]等，这些新的技术方法为我们提供了巨大的便利，提高了分离效率。

2.抑菌活性测定方法

离体培养和活体培样是研究从天然植物中分离得到的植物成分的抑菌活性的两种主要方式。

离体培养法，即观察目标化合物与植物病原菌的直接接触后的菌丝、孢子生长状况，通过生长状况的好坏，判定其对病原菌抑制作用的大小。离体测试方法：1、混毒法2、孢子萌发法 3、其他的如刃天青培养法，以及用于测定易挥发的物质的熏蒸法、活体细胞代谢指示法，薄层层析-生物自显影法等[6]。

活体实验法，即以植物细胞或相关的酶系为实验材料测定天然产物的抗菌活性，常用的方法有：蚕豆叶片法、叶片漂浮法以及抗氧化实验法[4]。大多数活体实验方法常和离体抑菌测定法相结合，共同测定天然产物抗菌活性，以此来避免一些物质的漏筛。

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